Una tecnología metatranscriptómica robusta para estudios a escala poblacional de la dieta, el microbioma intestinal y la salud humana
Autores: Andrew, Hatch; James, Horne; Ryan, Toma; Brittany L., Twibell; Kalie M., Somerville; Benjamin, Pelle; Kinga P., Canfield; Matvey, Genkin; Guruduth, Banavar; Ally, Perlina; Helen, Messier; Niels, Klitgord; Momchilo, Vuyisich
Idioma: Inglés
Editor: Hindawi
Año: 2019
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
microbioma intestinal
estudios a escala
Viomega
amplia gama
conservació
n de muestras a temperatura ambiente
mé
todo metatranscriptó
mico de heces automatizado
aná
lisis cuantitativo de la expresió
n gé
nica microbiana
resultado plataforma tecnoló
gica metatranscriptó
mica de heces
aná
lisis metatranscriptó
mico de heces
visió
n funcional integral
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Es necesario disponer de una lectura funcional del microbioma intestinal para poder controlar con precisión sus funciones, que favorecen la salud humana y previenen o minimizan una amplia gama de enfermedades crónicas. El análisis metatranscriptómico de las heces ofrece una visión funcional completa del microbioma intestinal, pero a pesar de su utilidad, rara vez se ha utilizado en estudios clínicos debido a su complejidad, coste y dificultades bioinformáticas. Este método también ha recibido críticas debido a la posible variabilidad entre muestras, los cambios rápidos y la degradación del ARN. Aquí describimos un método metatranscriptómico de heces robusto y automatizado, denominado Viomega, desarrollado específicamente para estudios a escala poblacional. Viomega incluye la recogida de muestras, la conservación de muestras a temperatura ambiente, la extracción de ARN total, la eliminación física de los ARN ribosómicos (ARNr), la preparación de bibliotecas direccionales Illumina, la secuenciación Illumina, la clasificación taxonómica basada en una base de datos de >110.000 genomas microbianos y el análisis cuantitativo de la expresión génica microbiana utilizando una base de datos de ~100 millones de genes microbianos. Aplicamos este método a 10.000 muestras de heces humanas y realizamos varios estudios a pequeña escala para demostrar la estabilidad y consistencia de las muestras. En resumen, Viomega es una plataforma tecnológica metatranscriptómica de muestras de heces barata, de alto rendimiento, automatizada y precisa para estudios a gran escala y una amplia gama de aplicaciones.
Descripción
Es necesario disponer de una lectura funcional del microbioma intestinal para poder controlar con precisión sus funciones, que favorecen la salud humana y previenen o minimizan una amplia gama de enfermedades crónicas. El análisis metatranscriptómico de las heces ofrece una visión funcional completa del microbioma intestinal, pero a pesar de su utilidad, rara vez se ha utilizado en estudios clínicos debido a su complejidad, coste y dificultades bioinformáticas. Este método también ha recibido críticas debido a la posible variabilidad entre muestras, los cambios rápidos y la degradación del ARN. Aquí describimos un método metatranscriptómico de heces robusto y automatizado, denominado Viomega, desarrollado específicamente para estudios a escala poblacional. Viomega incluye la recogida de muestras, la conservación de muestras a temperatura ambiente, la extracción de ARN total, la eliminación física de los ARN ribosómicos (ARNr), la preparación de bibliotecas direccionales Illumina, la secuenciación Illumina, la clasificación taxonómica basada en una base de datos de >110.000 genomas microbianos y el análisis cuantitativo de la expresión génica microbiana utilizando una base de datos de ~100 millones de genes microbianos. Aplicamos este método a 10.000 muestras de heces humanas y realizamos varios estudios a pequeña escala para demostrar la estabilidad y consistencia de las muestras. En resumen, Viomega es una plataforma tecnológica metatranscriptómica de muestras de heces barata, de alto rendimiento, automatizada y precisa para estudios a gran escala y una amplia gama de aplicaciones.