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El sistema reportero para el ensayo de GPCR con la levadura de fisión

Autores: Sasuga, Shintaro; Osada, Toshiya

Idioma: Inglés

Editor: Hindawi Publishing Corporation

Año: 2012

Disponible con Suscripción Virtualpro

Artículos


Categoría

Ingeniería y Tecnología

Licencia

Atribución – Compartir igual

Consultas: 8

Citaciones: Sin citaciones


Descripción
Los receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) están asociados con una gran variedad de actividades biológicas. Las levaduras son a menudo utilizadas como anfitriones para ensayos heterólogos de GPCR. Ingeniamos plásmidos reporteros intensos para la levadura de fisión para producir proteína fluorescente verde (GFP) a través de su vía endógena de GPCR. Como región de control de la expresión de GFP en el plásmido reportero, nos enfocamos en siete genes endógenos específicamente activados a través de la vía. Cuando las regiones aguas arriba de estos genes se utilizaron como promotor inducible en combinación con el terminador LPI, la región aguas arriba produjo GFP de forma más rápida e intensa a pesar del alto fondo. Posteriormente, el terminador LPI fue reemplazado con las regiones aguas abajo correspondientes. La región aguas abajo SPBC4.01 mejoró la respuesta con un bajo fondo. Además, al combinar la

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