Se desarrolló y validó un método RP-HPLC sencillo, sensible y preciso acoplado a un detector UV para la determinación simultánea de matrina y tinidazol en loción compuesta. La separación cromatográfica de los dos compuestos se llevó a cabo con una columna analítica SinoChoom ODS-BP C18 (5 μm, 4,6 mm × 200 mm), utilizando una fase móvil consistente en dihidrógeno fosfato de potasio 0,025 mol/L (conteniendo trietilamina 0,05%, v/v) y acetonitrilo (80 : 20, v/v) a un caudal de 1,0 mL/min. La detección se monitorizó a 210 y 310 nm para matrina y tinidazol, respectivamente. El tiempo total de ejecución fue de 12 min, y la columna se mantuvo a 25°C. Los excipientes de la loción compuesta no interfirieron con los picos del fármaco. Las curvas de calibración de matrina y tinidazol fueron bastante lineales en los rangos de concentración de 10,0-100,0 μg/mL (r=0,9954) y 20,0-200,0 μg/mL (r=0,9968), respectivamente. La RSD de las variaciones intradía e interdía fue inferior a 1,5 para la matrina y el tinidazol. El método HPLC propuesto se validó de acuerdo con la Conferencia Internacional de Armonización y demostró ser adecuado para la determinación simultánea de matrina y tinidazol en loción compuesta.